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一種生殖細(xì)胞核仁和雄性發(fā)育必須的泛素連接酶

發(fā)布時間:2024/10/28 14:44:05

Cullin-RING泛素連接酶(CRL)是泛素連接酶中規(guī)模較大的一類,功能多樣,參與調(diào)控數(shù)百種細(xì)胞過程。研究發(fā)現(xiàn),CRL4DCAF-1在調(diào)控核糖體生物合成方面扮演著源遠(yuǎn)流長的角色,這一功能在進(jìn)化歷程中得以保留,其調(diào)控目標(biāo)之一是PWP1蛋白。這意味著CRL4DCAF-1可能通過調(diào)控PWP1的活性來影響核糖體的形成與功能。這一發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步理解核糖體生物合成的調(diào)控機(jī)制提供了新的線索和切入點。


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圖1 在成年的 dcaf-1(RNAi) 生殖系中,滅活(inactivation)挽救了 dcaf-1 生殖細(xì)胞缺陷,并且使得FOG-1和FOG-3水平的增加。a)這里是在25°C下生長,并經(jīng)過對照組、dcaf-1組和ddb-1組RNAi處理的fog-1(q253ts)突變成年個體的DIC圖像。生殖系的遠(yuǎn)端區(qū)域位于左上方(有一個星號標(biāo)記)。b)這是在成年個體中,表達(dá)3xMyc-FOG-1和FOG-3::3xFLAG,并分別通過對照RNAi(頂部)或dcaf-1 RNAi(中部)處理后,用Hoechst 33258 DNA染料和抗-Myc和抗-FLAG抗體標(biāo)記的解剖過的生殖腺的免疫熒光圖像。用dcaf-1 RNAi處理的野生型成年個體(底部)被用作Myc和FLAG染色的陰性對照。生殖腺的遠(yuǎn)端末端位于左側(cè)(用星號標(biāo)記)。c) 這是在經(jīng)過對照RNAi或dcaf-1 RNAi處理的成年個體的生殖系遠(yuǎn)端和近端區(qū)域中的3xMyc::FOG-1和FOG-3::3xFLAG水平的圖表。


該實驗采用鑫圖Dhyana 400BSI相機(jī)進(jìn)行高質(zhì)量圖像數(shù)據(jù)采集。該相機(jī)采用背照式sCMOS結(jié)構(gòu),其峰值量子效率高達(dá)95%,讀出噪聲低至1.1 e-,可以在低光條件下快速捕捉微弱的熒光信號;6.5 μm像元尺寸能很好地平衡高NA顯微鏡的空間采樣率和靈敏度的需求,對樣本進(jìn)行清晰、高動態(tài)成像;鑫圖第三代Dhyana 400BSI相機(jī)還提供高達(dá)100 fps@4.2MP的速度,可以更快速捕捉動態(tài)變化的信號,實現(xiàn)對樣本的實時動態(tài)觀察。憑借其出色的性能,Dhyana 400BSI相機(jī)可適用于多種苛刻的熒光成像需求。


參考文獻(xiàn)


Rahman M M, Balachandran R S, Stevenson J B, et al. The Caenorhabditis elegans cullin-RING ubiquitin ligase CRL4DCAF-1 is required for proper germline nucleolus morphology and male development[J]. Genetics, 2023: iyad126.


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